其他生物产业检测

一、实验目的

掌握藻种活化、无菌培养基配制、分级接种扩大培养操作，理解温度、湿度、光周期、光照强度对微藻生长增殖的影响。熟练掌握人工气候培养箱开机自检、多段光温湿程序编辑、样品摆放排布、数据调取导出、设备清洁维保全套标准化操作。建立藻类微生物可控环境扩大培养标准化作业体系，获得生长状态均一的藻种培养液，满足微藻生理、饵料开发科研溯源归档需求。

二、实验仪器与耗材

（一）核心检测设备

植物生长箱，500L 人工气候生长箱，内胆为不锈钢材质，环形多向柔和送风，三面全光谱 LED 光照；彩色触控屏可编程控制系统，层架高度可自由调节，具备超温报警、压缩机延时保护、断电记忆，可拓展数据追溯存储模块，配套可调载物托架。

（二）配套耗材与辅助器具

专用耗材：小球藻藻种、藻类专用液体培养基；75% 酒精消毒液；前处理器具：无菌三角培养瓶、无菌移液管、无尘擦拭纸；配套设备：超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、紫外分光光度计；质控介质：空白无菌培养基、已知浓度参比藻液。

（三）待测样品明细：小球藻藻类微生物培养液；每组设置 4 次生物学平行，每批次放置空白培养基随行对照，消除箱内层间光温湿差异带来系统误差。

三、实验操作全过程

仪器开机与程序设置：确认箱内洁净无残留杂物，接通电源开机自检。按照微藻培养要求编写昼夜多段程序，设置对应培养温度、相对湿度、光照时长与光照强度，开启循环风道，等待箱内温湿度达到设定平衡。

藻种预处理与样品摆放：超净台内完成藻种活化与接种，将装好藻液的三角培养瓶平稳摆放在箱内不同层架，瓶间预留空隙保障气流流通，瓶身不可紧贴箱壁。

程控扩大培养：关闭箱门，启动昼夜自动循环程序开展藻类扩培；尽量减少开门频次；到达培养周期，取出藻液测定OD₅600 生物量；平行样品 OD 值 RSD 超出允许范围，检查摆放位置与程序参数后重新复测。

数据存储与台账整理：调用或导出箱内温光湿全程运行记录，记录藻种编号、培养基配方、程序参数、培养瓶摆放层位、OD 检测结果；记录污染、黄化异常样品；完整记录仪器参数、操作人员信息。

设备清洁与维保归档：试验结束取出全部培养瓶，清理箱内溅洒藻液、冷凝水，内胆擦拭消毒；长期停机保持箱门微开通风，定期执行仪器自诊断；电子数据、纸质原始台账同步归档留存。

四、实验结果与讨论

（一）藻类扩培养质控汇总表

（二）本方案应用优势

设备环形多向送风，箱内温度、湿度、光照三维环境均匀稳定，降低不同层架之间藻液生长差异；支持多段昼夜程控，精准复现藻类生长光周期条件；全光谱 LED 光源光照无级可调，适配不同微藻光需求；选配数据自动记录模块完整留存试验全过程环境参数，500L 大容积可实现大批量藻瓶同步扩培；多重安全防护，支持长时间无人值守运行。

（三）关键操作注意事项

培养瓶不可密封，预留透气缝隙；样品不能紧贴箱体内壁，避免局部微环境异常；箱内冷凝水及时清理，防止滴入培养瓶造成杂菌污染；内胆定期擦拭消毒；定期核查箱内温湿度示值准确性。

五、结论

本实验采用植物生长箱，依据 DB33/T 23002020 单胞藻规模化培养技术规范完成小球藻微生物扩大培养。整套标准化流程包含藻种活化接种、程序编辑设置、程控扩培、生物量检测、设备维保全作业环节。仪器温光湿环境均匀可控，试验重复性良好，可广泛用于水产科研院所、环境实验室微藻藻种保藏与实验室规模扩大培养工作。